SUMMARY: BACKGROUND: In a previous publication we described a method for Jk(a)/Jk(b), Fy(a)/Fy(b), S/s, K/k, Kp(a)/Kp(b), Js(a)/Js(b), Co(a)/Co(b), and Lu(a)/Lu(b) genotyping based on a microsphere suspension array. Here, an improved version of the assay is presented. METHODS: TWO MULTIPLEX POLYMERASE CHAIN REACTIONS (PCR) WERE DEVELOPED: one for amplification of samples routinely tested and the other for those systems that are tested less frequently. Each biotinylated PCR product is hybridized in a single multiplex assay. A total of 2,020 samples were analyzed, and the genotypes were compared to the blood group phenotypes. RESULTS: There have been no discrepancies with the serology results other than null and/or weak phenotypes. CONCLUSION: In its present form, the method presented here has the capacity to genotype hundreds of a samples in few hours with a high concordance rate with serology.
Hintergrund: In einer vorangegangenen Publikation beschrieben wir eine Methode für die Jka/Jkb-, Fya/Fyb-, S/s-, K/k-, Kpa/Kpb-, Jsa/Jsb-, Coa/Cob- und Lua/Lub-Genotypisierung basierend auf einem Mikrosphären-Suspensions-Array. An dieser Stelle präsentieren wir nun eine verbesserte Version dieses Assays.
Methoden: Zwei Multiplex-Polymerase-Kettenreaktionen (Multiplex-PCR) wurden entwickelt: eine für die Amplifizierung der routinemäßig getesteten Proben, die andere für solche Systeme, die weniger häufig untersucht werden. Jedes biotinyliertes PCR-Produkt wird in einem einzelnen Multiplex-Assay hybridisiert. Insgesamt wurden 2020 Proben analysiert und deren Genotypen mit den Blutgruppenphänotypen verglichen.
Ergebnisse: Außer Null- und/oder schwachen Phänotypen gab es keine Abweichungen zwischen den Genotypuntersuchungen und den serologischen Resultaten.
Schlussfolgerung: In seiner derzeitigen Form hat die hier präsentierte Methode die Kapazität, hunderte von Proben in wenigen Stunden zu genotypisieren und dabei eine hohe Übereinstimmungsrate mit den serologischen Ergebnissen aufzuweisen.